［研究报告］苹果酵素对微囊藻的溶藻特征研究

2015-07-09倪兆林、申元英等酵道孝道

水体的富营养化污染不仅破坏了水生生态系銃 的甲衡■而且产生有毒有害的莫类唯筋.甲藻、硅藻.、 异弯藻等）引起水华或赤潮，释放有毒物质：对公欢 健康、牲帝和水源供路带来贝面影响,皂至戸市危書 生态安全♦因此，寻找合理有效的水华藻类防治方法迫在眉睫；泰保酵素技术是泰国乐素昆•普爵翁博土 革曾項目區潔祕潔女专取四D7iD5mk0CHg3 :云南嘗載阿厅利学面究是会Co I關叫9; son年度大奪市的頻扇科命計炫 n:大理学 暁沏灣酔研奖专底漂塹ilYHiLMJSCMlS作者働奇.国非林hw了T 1明.臻±蜻驚生-*羿流行辨与卫生垸 g壊疏作罪■申瓦英! k-oiul xucnyu^iyrir沽3qan 緑过女）至年努力所研推的一辩果皮話荣厨余酵素， 是对混樽了槍利水的画房鮮垃圾既过网如发辭后产 生的犒色液怀的通偌称法，环保薛素的生产过程并不 使用任何化学晋成物质.在酿制过习:中，互相促进，共同构成一个复杂而穏定的具有争元功継的薜素生态 系线，可抑制有害微生物《尤其是病原後生物和楣敗 的活动，具有惺进植物生长、净化水流等作用； 燃而匡内沖尚未见环保酵咨在湖泊富童詐化中应用 的冥献报道.因此，本研穷初步採司了苹果酵素对•做 囊藻的作用特征及其作用机制，以期为苹果醉素在环 墓治理申的应用提供理雑俄据1材料与方哉LI

LL1藻种及我培养条件 实程應神为胡】I年7月 大理洱海蓝後暴发期间分寓純化.藻种些活化后，于 25弋、7級光源、光暗比I2h/12h茶件下，来市邠通用 BCJ!培养基在光晾培界箱中珂培界3Td.备用 LL2革果醇素的制备.将灯辖■,苹果、水按1蛆 3 k団。L混合后发酵5个月，得到苹果酵素，靜用， 1,13位器与试剤LC-300光臆培养箱（中国广州庫 恒悦器為限観司.SW-CJ-2FD洁净工幷含《苏州安療 空气技术有限公司）JA120331电子天平（上海精密科 学值器有限伝司，YXQ-LS-50S以立式压力感气灭菌 琴Lt海博讯实些有限俗司医疗设备厂）,TGr-l6GB 枪択台式离心机（±海韮怡尔分析仪器有阻公可， P^crwavc福逑蟻波长糖标值（上海博也实业荷限公 司医疗设密门,丙弟LAH,云南詁潰药业石限公司 L2 方産1X1叶緑StaKh做含量的漪定” 每天定嗣取 1 nd待测藻液，以4000加in离心儡心半径为3涂 10 mil.,彝吿上渣液,加入等体积知％ 的的丙串，混 含均匀，将塞句的淮体于4 P、黑暗条件下抽提24 h, 再以4 000 rfnun离心（聪心堆径为3enj 10 min,取上 洎.里连煥波姓酶标俱分别測宅665、649 nm处的翼光 度⑶值，并计算叶緑素■同ml的倉St《叶鑼寮u含 量= E3Jx4w-S.76知盘叫叶翊素a的清除率豈征溶 蓬敵果，叶蟻翥a的酒隸率=E制始溶渣中叶緑素a含 S-£fi£后溶液中叶绿撮a含量）用n始时溶液中叶塚 素U倉驚X100瑶£12,2加人不同体积的苹果酵素对微馥藻的溶解作 用 分剤取W ml切始叶饅素.为L⑵曲面的皺 驟鲂液于】加nJ三角烧瓶中.再依次加入0 （聽 阚＜0」、（13浏.5、£|瓦】、丄3 mJ的萍果醉需进行溶藤 卖幾，培詐簽％同“ 1丄1″ ,每天定时取样贏定叶绿甥a 的含壹変化，连壊观察4此每组做3个平行、L2.3将草巣醉弟稀聲卮对械H繭的溶解作用将 華果的憲用服繭蒸馄水様度WW （原鬧,10 \10 \ !0 ；!0MD¹|_r^iJ取不同样度的稀释液各3点,分别 加人30前初始叶録腐a为1」由岫I的凿窮蘑離 液中诳行溶藻实验，空白组加入3 ml蒸榴水，每个株 匿设贖个平行，培养条件同每天定时羣样 测定叶緑素a的含量暨化，迷续观察4 d,1.2.4革果醉素的溶藻方式分術取原液■，绶斷 浦膜抽浦2次、高温灭董CI2I    M玮天圖20miri、\H 12 OGO i/min 高心（高心半径为 3 ctti 15 miu 。洒唾蔭策白奮处理15 min的苹果酵素3 ml,分别加 A 30 ml初始叶绿素a为J.12I噂制的锹囊藻淳波 中进行溶簸实验,空白组加入3 ml義保水.毎组设 3个平行，培养条件冋■’ 1,1,1。每天定肘取样测定叶緑 素a的含量，连城照県4丄2站果，导讨论2.1加入不回除耕的革耒時蠹时墮邕薄的淳解戦果 与対照蛆相比.貌艄入苹果酵素最的钢刘.叶绿素“的 含量先下降后上升.尤其在加A 0.6 ml时叶嫌素a含量 下降絞大，旦第4天叶绿翥a的清除率灘太由M48盼, 而JBAOJ ml単果酵崙组的叶緑素■含量没有下降， 说明苹果解整在被浓度下无溶藻作用.現表Inffi. I垣人K冋恠ui苹果部講对微壽讀的溶解作用站果｛1″3耳司

与対黑组相tt,经0.22用H波膜抽源2次、高温灭菌、 以IW 000 ritnin曄心《离心半径为3 enj IS fiiin,0.25% 胰笛白萌处理15皿“的篇需顔色登黄，几乎看不到療 色蒸颗粒物廣，叶緑素a含量下降.華果對素条过 0.22 jini波膜过惡和闭速蔺心后仍然具冇溶藻作用, 说明谖苹果醉素产生了一稗舞殊构质间接作用于讓 順粒.而旦廳过高温处理和Q25%的談螢白酶处强后 仍然聘溶麟頂順芯.説明该草果甯素严生溶菠作用 的麴廣具有很竭的熱瑋定懐，旦不屬于萤白旗类見

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